Leukemia Research, Год журнала: 2024, Номер 148, С. 107635 - 107635
Опубликована: Дек. 5, 2024
Язык: Английский
Chemical Engineering Journal, Год журнала: 2025, Номер unknown, С. 161653 - 161653
Опубликована: Март 1, 2025
Язык: Английский
Процитировано
0
Advances in Colloid and Interface Science, Год журнала: 2025, Номер unknown, С. 103497 - 103497
Опубликована: Март 1, 2025
Язык: Английский
Процитировано
0
Vestnik, Год журнала: 2025, Номер 1(72), С. 28 - 42
Опубликована: Март 25, 2025
Introduction. Chimeric Antigen Receptor T-cell (CAR-T) therapy represents a breakthrough in the treatment of relapsed and refractory hematologic malignancies. However, its application is limited by high production costs technical complexity. In Kazakhstan, approximately 180–240 patients annually require this type therapy, yet access remains virtually unavailable. Aim. This study aimed to develop localized standardized protocol for CD19-specific CAR-T cells using an automated manufacturing system. Materials methods. The CliniMACS Prodigy platform was used isolation, activation, lentiviral transduction with vectors encoding CD19 CAR construct. Functional activity assessed via flow cytometry CD19-positive (Raji) CD19-negative (K562) target cell lines. Quality control included sterility testing, verification replication-competent lentivirus absence, phenotypic analysis product. Results. resulting products met international quality standards terms sterility, lack virus, CD3+CAR+ content (75.18%). vitro experiments demonstrated specific cytotoxicity against CD19+ targets minimal nonspecific lysis CD19− (K562). developed validated enables has potential significantly improve accessibility Kazakhstan. data support feasibility effective products, which could greatly enhance outcomes severe malignancies region. Conclusion. proposed meets allows generation high-quality cellular B-cell cancer therapy. Кіріспе. Химералық антигендік рецепторлар негізіндегі терапия – рефрактерлі онкогематологиялық ауруларды емдеудегі серпінді бағыттардың бірі болып табылады. Алайда бұл әдістің қолданылуы өндірістің күрделілігі мен құнының жоғары болуына байланысты шектеулі. Қазақстанда жыл сайын шамамен науқас осындай терапияға мұқтаж, бірақ оларға қолжетімділік іс жүзінде жоқ. Мақсаты. Зерттеу мақсаты — антигеніне спецификалық жасушаларын алу үшін автоматтандырылған жүйені пайдалана отырып, жергілікті және стандартталған өндіріс протоколын әзірлеу. Материалдар әдістер. рецепторын кодтайтын лентивирустық векторларды Т-лимфоциттерді бөліп алу, белсендіру трансдукциялау платформасы қолданылды. жасушаларының функционалдық белсенділігі протокеттік цитометрия әдісімен CD19- жасушалық желілерінде зерттелді. Сапаны бақылау стерильділікті, репликацияға қабілетті вирустың болмауын препараттардың фенотиптік сипаттамаларын бағалауды қамтыды. Нәтижелер. Стерильділік, болмауы үлесі (75,18%) сияқты халықаралық стандарттарға сай келетін препараттары алынды. vitroжағдайындағы тәжірибелерде нысан-жасушаларына қатысты цитоуыттылығы көрсетілді, ал жасушаларына емес лизис мардымсыз болды. Жасалған валидацияланған протокол өндірісті стандарттауға терапиясының Қазақстандағы қолжетімділігін арттыруға мүмкіндік береді. Нәтижелер препараттарын деңгейде тиімді өндіру мүмкіндігін дәлелдейді, өңірдегі ауыр гематологиялық аурулары бар науқастарды емдеу келешегін айтарлықтай жақсарта алады. Қорытынды. Ұсынылған негізінде CD19-спецификалық протоколы талаптарға сәйкес келеді B-жасушалы емдеуге арналған сапалы препараттар алуға Введение. Терапия на основе химерных антигенных рецепторов является прорывом в лечении резистентных форм онкогематологических заболеваний, однако её применение ограничено высокой стоимостью и сложностью производства. В Казахстане ежегодно около 180-240 пациентов нуждаются такой терапии, но доступ к ней практически отсутствует. Цель. Настоящее исследование посвящено разработке локализованного, стандартизированного протокола производства CAR-T-клеток, специфичных антигену CD19, с использованием автоматизированной системы. Материалы методы. Использовали автоматизированную платформу для выделения, активации трансдукции Т-лимфоцитов лентивирусными векторами, кодирующими рецептор CAR. Оценивали функциональную активность CAR-T-клеток методом проточной цитометрии клеточных линиях K562 (CD19-) Raji (CD19+). Контроль качества включал тестирование стерильности, отсутствие репликативно-компетентного вируса фенотипический анализ препаратов. Результаты. Получены CAR-T-клеточные препараты, соответствующие международным стандартам по отсутствию процентному содержанию клеток (75,18%). опытах продемонстрирована высокая специфическая цитотоксичность отношению мишеням (Raji), то время как неспецифический цитолиз был незначительным. Разработанный валидированный позволяет стандартизировать производство повысить доступность терапии Казахстане. Результаты подтверждают возможность реализации локального высокоэффективных CAR-T-препаратов, что может существенно улучшить перспективы лечения тяжёлыми формами гематологических заболеваний регионе. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, предложенный CD19-специфичных платформы соответствует критериям получать высококачественные клеточные препараты B-клеточных заболеваний.
Язык: Русский
Процитировано
0
Clinical Rheumatology, Год журнала: 2025, Номер unknown
Опубликована: Апрель 26, 2025
Язык: Английский
Процитировано
0
mAbs, Год журнала: 2024, Номер 16(1)
Опубликована: Апрель 18, 2024
There is no doubt that today's life sciences would look very different without the availability of millions research antibody products. Nevertheless, use reagents are poorly characterized has led to publication false or misleading results. The laboratory animals produce antibodies also been criticized. Surprisingly, both problems can be addressed with same technology. This review charts maze formats and various methods for production their interconnections, ultimately concluding sequence-defined recombinant offer a clear path improved quality experimental data reduced animals.
Язык: Английский
Процитировано
3
Sechenov Medical Journal, Год журнала: 2024, Номер 15(2), С. 36 - 47
Опубликована: Июль 31, 2024
Aim. To evaluate the antitumor efficacy of our developed drug based on cytotoxic T lymphocytes genetically modified with a chimeric antigen receptor (CAR) specific to CA125 in relation both CA125-positive and CA125negative cell cultures. Materials methods. We performed an vitro study human ovarian cancer cells (OVCAR-3, OVKATE) negative (breast MCF 7, embryonic kidney HEK293). Cytotoxic effects tumor were evaluated after 0, 4, 8 24 hours using 3’-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) Lactate Dehydrogenase (LDH) tests. also studied changes number “in real time” when exposed transfected RTCA iCELLIgence device (ACEA Biosciences, USA). Lymphokineactivated killer (LAK) used as specificity control. Results. The demonstrated that anti-CA125 CAR-T exhibited pronounced effect OVCAR-3 OVKATE cultures, exceeding LAK by 1.3 times. population experimental samples decreased 70 ± 4%, which exceeded 9 8.2%. With regard MCF-7 line, was minimal evidenced 25.8% decrease relative live comparison cytotoxicity 68%. Real-time monitoring proliferation viability proved high against cultures expressing CA-125, while inferior not (MCF-7, Conclusions. use lines LAK, achieved CA125-negative HEK293 cells.
Язык: Английский
Процитировано
0
International Journal of Molecular Sciences, Год журнала: 2024, Номер 25(16), С. 8556 - 8556
Опубликована: Авг. 6, 2024
In this study, we present the design, implementation, and successful use of digital droplet PCR (ddPCR) for monitoring chimeric antigen receptor T-cell (CAR-T) expansion in patients with B-cell malignancies treated different CAR-T products at our clinical center. Initially, designed a specific highly sensitive ddPCR assay targeting junction between 4-1BB CD3ζ domains tisa-cel, normalized RPP30, validated it using blood samples from first tisa-cel-treated patient Switzerland. We further compared published qPCR (quantitative real-time PCR) design. Both assays showed reliable quantification copies down to 20 copies/µg DNA. The reproducibility precision were confirmed through extensive testing inter-laboratory comparisons. With introduction other products, also developed corresponding axi-cel brexu-cel, demonstrating high specificity sensitivity limit detection These are suitable copy number across multiple sample types, including peripheral blood, bone marrow, lymph node biopsy material, showing robust performance indicating presence cells not only but target tissues. Longitudinal cell kinetics 141 axi-cel, or brexu-cel revealed significant long-term persistence. Peak correlated outcomes adverse effects, as is now well known. Additionally, quantified mRNA expression, correlation DNA numbers confirming active transgene expression. Our results highlight quality monitoring, providing sensitive, precise, reproducible method applications. This approach can be adapted future will support management therapies.
Язык: Английский
Процитировано
0
Leukemia Research, Год журнала: 2024, Номер 148, С. 107635 - 107635
Опубликована: Дек. 5, 2024
Язык: Английский
Процитировано
0